@Demi-Schrauwen
In ons onderzoeksvoorstel beschrijven we wat en waarom we dit willen onderzoeken. We willen dus de enzymwerking op de proef stellen. En we denken dat dit handig kan zijn voor diëtisten die zo een gepast dieet kunnen opstellen voor de optimale omstandigheden voor enzymen. We willen een proef opstellen waarbij we 2 specifieke enzymen (amylase en maltase) nemen. Hier een stukje uit ons document:
Werkwijze per onafhankelijke variabelen:
pH-waarde:
Doel: Bepalen bij welke pH-waarde het enzym optimaal werkt.
Bereid vier reageerbuizen voor met 2 mL substraatoplossing en per reageerbuis een andere pH-buffer van 1mL.
Voeg hierna 1 mL 100% enzymoplossing toe.
Plaats alle buizen in een waterbad op een temperatuur van 37 graden Celsius.
Meet met een stopwatch de reactietijd van 5 minuten.
Meet per buis het afgebroken substraat of gevormd product, per één minuut, doormiddel van (afhankelijk van enzymsoort, het ene enzym word gemeten doormiddel van reagentia en het andere doormiddel van test strips.):
Kleurreactie met reagens
Spectrofotometrie
Temperatuur:
Doel: Bepalen bij welke temperatuur het enzym optimaal werkt.
Bereid vier reageerbuizen voor met:
2 mL substraatoplossing
1 mL buffer met constante pH (met pH die ook in het menselijk lichaam voorkomt waar de enzymen zich bevinden)
Voeg 1 mL enzymoplossing toe aan de buizen
Plaats elk buisje in een waterbad met een andere temperatuur (20 °C, 30 °C, 40 °C en 60 °C).
Meet met een stopwatch de reactietijd van 5 minuten.
Meet per buis het afgebroken substraat of gevormd product, per één minuut, doormiddel van (afhankelijk van enzymsoort, het ene enzym word gemeten doormiddel van reagentia en het andere doormiddel van test strips.):
Kleurreactie met reagens
Spectrofotometrie
Enzymconcentratie
Bereid vier reageerbuizen voor met 2 mL substraatoplossing en per voeg reageerbuis een constante pH buffer toe (met pH die ook in het menselijk lichaam voorkomt waar de enzymen zich bevinden).
Voeg hierna in alle reageerbuizen een andere oplossing enzymen met steeds een andere concentratie (100%, 50%, 25%, 10%) toe.
Plaats alle buizen in een waterbad op een temperatuur van 37 graden Celsius.
Meet met een stopwatch de reactietijd van 5 minuten.
Meet per buis het afgebroken substraat of gevormd product, per één minuut, doormiddel van (afhankelijk van enzymsoort, het ene enzym word gemeten doormiddel van reagentia en het andere doormiddel van test strips.):
Kleurreactie met reagens
Spectrofotometrie
Algemeen:
Reageerbuizen
Pipetten
Maatcilinders
Bekerglazen
Waterbad met temperatuurregeling
pH-meter en pH-strips
spectrofotometer
labjas en bril
Benodigdheden per enzym:
Amylase:
zetmeeloplossing
jodiumoplossing
Amylase
pH buffers 5 t/m 8
Maltase:
maltose (substraat)
glucose oxidatie kit
pH buffers 5 t/m 8
We hebben voor nu twee hele specifieke enzymen gekozen. We kunnen hier altijd van afwijken als deze niet beschikbaar zijn o.i.d. We horen graag van jullie!
Met vriendelijke groet,
